Los macrófagos tisulares representan una población minoritaria de monocitos en sangre periférica. Las proteasas de sus fagolisosomas digieren células apoptóticas fagocitadas en el teijdo del que provienen, incluyendo proteínas específicas de ese tejido (sano y enfermo); según el contenido de sus fagolisosomas, cada macrófago tisular circulante podría ser asignado a un tejido concreto. El objetivo general del presente proyecto se centra en el desarrollo y validación de una nueva herramienta diagnóstica para el rastreo en una pequeña muestra de sangre periférica de la existencia de enfermedad oculta en otro tejido, para la detección precoz de dicha enfermedad y su monitorización terapéutica. Objetivos concretos: 1) Definir las características fenotípicas y funcionales de las distintas subpoblaciones de monocitos circulantes, en especial de los macrófagos tisulares circulantes; 2) Desarrollar una herramienta informática que permita visualizar en una representación bidimensional los distintos estadios de maduración de dichas células; 3) Desarrollar estrategias metodológicas para evaluar el contenido de los fagolisosomas en los macrófagos tisulares circulantes, para la detección de fragmentos de proteínas derivadas de células plasmáticas mielomatosas o células B linfomatosas; y 4) Validación y utilidad del método desarrollado respecto a métodos convencionales para el diagnóstico en sangre periférica de mieloma múltiple y linfomas no Hodgkin B. Se empleará la citometría de flujo para identificar (en células individualizadas) en las diversas poblaciones de monocitos y macrófagos tisulares la presencia a nivel intracelular de fragmentos de proteínas o péptidos específicos del tejido alterado. Para ello, se emplearán técnicas altamente sensibles de citometría de flujo multiparamétrica (= 8 colores), con anticuerpos monoclonales que identifiquen simultáneamente la población celular de interés y las proteínas específicas de tejido intracelulares y se analizarán con programas.

macrófagos tisulares circulantes
subpoblaciones de monocitos
citometría de flujo
diagnóstico precoz
monitorización