Durante los ultimos 3 años nuestro grupo ha trabajado en la identificación del gen responsable de un nuevo tipo de distrofia muscular (DM) autosómica recesiva. Ha descubierto una mutación homocigota en el gen POGLUT1, responsable de la O-glicosilación de Notch, y es la primera vez que se asocia una enfermedad humana a este gen. OBJETIVOS: 1. Identificar más pacientes en el SNS portadores de mutaciones en POGLUT1; 2. Demostrar un defecto en la regeneración muscular de estos pacientes debido a un defecto de activación de Notch, como sugieren diferentes modelos experimentales y establecer si existe un efecto modulador en la expresión de alfa-distroglicano (aDG) mediado por Notch en el músculo; 3. Explorar aDG como sustrato de POGLUT1; 4. Rescatar el fenotipo en cultivos celulares. METODOLOGÍA: 1. Selección de pacientes con DM y déficit de aDG en las Unidades de Referencia de Enf Neuromusculares (ENM) del Sur de España y en la Base de Datos ENM-CIBERNED, y aplicación de un protocolo estándar con exploración, biopsia muscular, resonancia muscular y estudio molecular de POGLUT1 o exoma ; 2.1 Expresión de factores de regeneración miogénicos (MRF) , aDG y Notch mediante WB y RT-qPCR en biopsias musculare y análisis de la diferenciación a miotubo en cultivos de mioblastos primarios mediante microscopía confocal; 2.2 Cuantificación de mRNA de aDG mediante RT-qPCR en línea celular C2C12 tras silenciamiento de POGLUT1 y Notch; 3.1 Ensayos de glicosilación in vitro con fibroblastos primarios ;3.2 Estudio muscular en mosca en un modelo de silenciamiento condicionado de rumi ; 4. Tratamiento de mioblastos primarios en cultivo con activadores de Notch.

distrofia muscular
O-glicosilación
Notch
alfa-distroglicano
POGLUT1