1.-Valorar la implicación de nuevos genes candidatos (seleccionados en el proyecto previo PI12/01853) en el desarrollo del fenotipo asociado a ciliopatías en modelos animales (Danio rerio). 2.- Obtención de líneas celulares silenciadas para los genes de interés. 3.- Estudio de las rutas de señalización TGF-ß y mTOR en los modelos silenciados para: a) Gen ALMS1 b) Genes del complejo BBSoma c) Genes tipo chaperona (BBS6-10-12) d) Nuevos genes candidatos 4.-Identificación de dianas terapeúticas. En primer lugar, se valorará el efecto fenotípico producido por el knockdown de los genes candidatos en el organismo modelo Danio rerio. Además, se obtendrán líneas celulares en las que los genes de interés se silenciarán mediante iRNA. Posteriormente, se procederá al estudio del efecto producido por el silenciamiento de dichos genes en las rutas de señalización propuestas. Para ello, se cuantificarán los niveles de mRNA mediante PCR a tiempo real, los niveles de expresión proteica mediante SDS-PAGE y WB, y, finalmente, se realizarán estudios de localización subcelular mediante inmunofluorescencia.

ciliopatías
rutas de señalización
dianas terapéuticas

Acción Estratégica en Salud (AES)