En un proyecto anterior, usando ratones RORasg/sg y NLRP3-/-, demostramos un aumento de Rev-Erba y descenso de RORa con la edad, que frena la expresión de BMAL1, promoviendo la activación del inflamasoma NLRP3, aumento de estrés oxidativo y déficit morfológico y funcional de las mitocondrias en músculo esquelético y cardíaco. Para identificar la relación entre cronodisrupción y sarcopenia, en este nuevo estudio vamos a valorar secuencialmente durante el envejecimiento el inicio de la cronodisrupción, cómo se activa la inmunidad innata y el estrés oxidativo, y por qué ese estrés oxidativo no es compensado por la vía de Nrf2, que permite que el proceso culmine en un déficit mitocondrial y pérdida de fibras musculares esqueléticas y miocárdicas. Para ello, vamos a usar ratones C57/Bl6 wt y los correspondientes deficientes en Rev-Erba, NFkB, y Nrf2, que se estudiarán a los 3, 12 y 24 meses de edad, con y sin tratamiento con melatonina. En ellos vamos a valorar: 1) el ritmo circadiano del reloj, incluyendo ritmo de expresión de los genes reloj, y ritmo de melatonina en plasma y en músculo; 2) fenotipaje (actividad locomotora y treadmill); 3) vía de activación de NF-kB (IkB, NF-kB, iNOS, COX-2, TNFa, pro IL-1ß, pro-IL-18, SOD, GPx, GRd); 4) vía de activación de NLRP3 (pro-caspasa-1/caspasa-1, IL-1ß, IL-18, NLRP3; RIP/pRIP); 5) vía de activación de Sirt1/Sirt3 (NAMPT, NAD+/NADH, Sirt1, Sirt3); 6) vía de activación de Nrf2 (G6PDH, NADPH, GSH/GSSH); 7) vía mitocondrial (respiración, ??m, OXPHOS, ATP/ADP, proton leak, mtDNA, estado redox, fisión, fusión y biogénesis mitocondrial, apoptosis, autofagia, y mitofagia incluyendo Tfam, PGC-1a, Bax, Bcl2, LC3, NIX, APG5, Pink1, Parkina, p62, Drp1, Mfn2, OPA1; 8) análisis del proceso inflamatorio y pérdida de capacidad bioenergética muscular por RNM, y 9) estructura (óptico) y ultraestructura (ME) del músculo esquelético y miocárdico.

envejecimiento
genes reloj
inmunidad innata
mitocondria
sarcopenia
proteína Nrf2
Nrf2
factor 2 relacionado con NF-E2
estrés oxidativo
melatonina

Acción Estratégica en Salud (AES)