El estudio de las bases moleculares de la Leucemia Mieloblástica Aguda (LMA) se ha centrado fundamentalmente en la identificación de mutaciones que alteran la secuencia codificante (exones) de diversos genes. Sin embargo, el mapeo de mutaciones en regiones no codificantes, incluso de aquellos genes que juegan un papel determinante en la leucemogénesis, permanece virtualmente inexplorado en la LMA. Entre estas regiones destacan las regiones intrónicas profundas, regiones promotoras, de splicing o las no traducidas (5'-UTR o 3'-UTR). Todas estas anomalías podrían conducir a una actividad transcripcional aberrante como consecuencia, entre otros, de la activación de sitios de splicing crípticos. Por otra parte, a pesar de su potencial papel como dianas terapéuticas, la importancia de las mutaciones que afectan a los componentes de la maquinaria del splicing (como SRSF2, U2AF1 y SF3B1) no ha sido explorada en profundidad en la LMA. En el presente proyecto se pretende analizar la secuencia completa y regiones reguladoras adyacentes de los genes considerados más relevantes en la LMA y en genes del spliceosoma mediante una estrategia de secuenciación masiva dirigida. Para ello se secuenciará la región genómica completa de 27 genes en 200 pacientes con LMA y se evaluará el efecto de las alteraciones genéticas detectadas mediante diferentes estrategias, tales como el estudio de modelos funcionales in silico para la priorización de variantes, la secuenciación del transcriptoma y ensayos con modelos celulares in vitro mediante ensayos de minigenes y CRISPR para validar el papel leucemogénico de las mutaciones detectadas.

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