Objetivo principal: Estudio clínico, histopatológico, bioquímico y molecular de pacientes con deficiencias de la fosforilación oxidativa mitocondrial (OXPHOS). Objetivos concretos: 1) Diagnóstico molecular de pacientes pediátricos con defectos OXPHOS. 2). Caracterizar funcionalmente las mutaciones por medio de estudios de función mitocondrial y de expresión y localización de proteínas: seleccionar pacientes con deficiencia de CoQ. 3). Validar biomarcadores de defectos OXPHOS (CoQ en orina, estudio del potencial de membrana mitocondrial y el perfil transcriptómico de pacientes mitocondriales). 4). Fenotipar bioquímicamente modelos celulares. Metodología: Diseño. Estudio transversal y prospectivo para la caracterización molecular de pacientes con deficiencias OXPHOS. Grupo 1. 43 pacientes con sospecha de deficiencia de OXPHOS que permanecen sin diagnóstico molecular. Grupo 2. Pacientes que se identifiquen durante la realización del proyecto (15 casos por año). Grupo 3. 44 pacientes con diagnóstico definitivo de defecto OXPHOS para la validación de los estudios funcionales. Estudios clínicos: Evaluación neurológica y estudio de otros órganos implicados. Estudios bioquímicos: Análisis metabolómico dirigido de metabolitos y biomarcadores relacionados con disfunción mitocondrial por cromatografía con diferentes sistemas de detección. Estudios histológicos en músculo y fibroblastos: Estudios morfológicos e histoquímicos por microscopía óptica y de fluorescencia. Estudios de microscopía confocal para detección de complejos OXPHOS y análisis del potencial de membrana mitocondrial. Estudios genéticos: Aplicación de técnicas de secuenciación de nueva generación por medio del panel TSO. Estudios de ADN mitocondrial, secuenciación completa y análisis de depleciones y deleciones. Secuenciación de exoma/genoma en casos sin diagnóstico.

enfermedad mitocondrial
fosforilación oxidativa
coenzima Q10
secuenciación de nueva generación
paciente pediátrico
microscopia confocal