Context: Autoimmune thyroid diseases (AITD) such as Graves' disease (GD) or Hashimoto's thyroiditis (HT) are autoimmune, organ-specific diseases with environmental and genetic influence. Objetivos: Investigar el papel del cilio primario del tirocito y su relación con los linfocitos infiltrantes en ETAI. Proporcionar asociaciones novedosas entre el microambiente inmune y los tirocitos en ETAI mediante secuenciación masiva de una sola célula. Diseño: La descripción y la identificación de los cilios primarios se determinarán en tejido tiroideo de controles (n = 10) y pacientes con ETAI (HT = 10 y GD = 10), y en cultivos celulares de tirocitos en condiciones proinflamatorias. Los cilios primarios se visualizarán y cuantificarán mediante imágenes capturadas en microscopios de super-resolución, como la microscopía de agotamiento de emisión estimulada (STED) y microscopía electrónica de barrido (SEM). Se cuantificarán los niveles de expresión de ARNm de los genes relacionados con procesos ciliares mediante PCR a tiempo real (qRTPCR), y las proteínas asociadas por Western Blot. Los resultados se correlacionarán con diferentes parámetros de la enfermedad, tales como: antecedentes familiares, tabaquismo, presencia de orbitopatía, hormonas tiroideas y anticuerpos antitiroideos, tratamiento con fármacos antitiroideos, radioyodo o cirugía, etc. Al mismo tiempo, la secuenciación masiva de mRNA de células individuales se realizará en 3 controles y 3 pacientes en linfocitos infiltrantes y tirocitos de tejido tiroideo. El análisis bioinformático se utilizará para determinar la heterogeneidad de las células inmunitarias y para caracterizar la huella patógenica de los tirocitos en las ETAI. Se realizaran estudios adicionales para caracterizar nuevas vías de susceptibilidad en las ETAI
Enfermedades tiroideas autoinmunes
inmunología
ómicas
secuenciación de célula individual
bioinformática
01/01/2020 - 31/12/2022
MARAZUELA AZPIROZ, MONICA
FUNDACION INVESTIGACION BIOMEDICA HOSPITAL DE LA PRINCESA
INSTITUTO DE INVESTIGACION BIOMEDICA HOSPITAL UNIVERSITARIO DE LA PRINCESA
MADRID
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