ANTECEDENTES: Con anterioridad hemos definido la huella genética de resistencia a múltiples fármacos (MDR) de tres adenocarcinomas gastrointestinales y hepáticos (GILAC) de gran relevancia clínica (adenocarcinoma de colon, adenocarcinoma gástrico y carcinoma hepatocelular). OBJETIVO: Desarrollar un método de purificación de microvesículas extracelulares (EMV) del suero para valorar el interés pronóstico de la detección en ellas de proteínas SLC y ABC implicadas en el fenotipo MDR de estos GILAC y evaluar su utilidad como dianas moleculares terapéuticas. METODOLOGÍA: Para purificar las EMV y determinar su tamaño y número se usará un equipo de “Field-Flow Fractionation” acoplado a microscopía de alta resolución y “Dynamic Particle Tracking”, concedido al IP por el MCIU (EQC2018-004591-P). El método se validará in vitro e in vivo antes de analizar serotecas de biobancos en un estudio retrospectivo y otro prospectivo. En las EMV se analizarán dúos de biomarcadores de quimiorresistencia y de tipo tumoral. Para identificar biomarcadores adicionales, se realizará un estudio genómico y proteómico de las MVE. Se estudiará la relación entre biomarcadores y respuesta a la quimioterapia. Las proteínas con valor predictivo se expresarán en modelos celulares para la identificación de fármacos sustratos de dichos transportadores. Los estudios cinéticos de la interacción fármaco-transportador, en oocitos de Xenopus laevis, orientarán un análisis in silico de “docking” molecular en una quimioteca de productos naturales y fármacos para identificar nuevos quimiosensibilizantes, que serán evaluados in vitro y en ratones con GILAC implantados. Se desarrollará una terapia génica quimiosensibilizante mediante la restauración de la expresión de genes SLC o la anulación de genes ABC (CRISPR/Cas9) utilizando vectores virales con selectividad tisular y tumoral regulable. El resultado se relacionará con la detección de biomarcadores de MDR en los tumores y las EMV del suero de estos ratones.

Adenocarcinoma Gástrico
Adenocarcinoma de colon
Carcinoma hepatocelular
CRISPR/Cas9
Edición Genómica
Exosomas
Quimiorresistencia
Quimiosensibilización
Terapia Génica
Vesículas extracelulares

Acción Estratégica en Salud (AES)