La sobreexpresión oncogénica de ciclina D1, caractarística del Linfoma de Células del Manto (LCM), determina una redución global de la transcripción, que parece estar mediada en parte por la interacción de D1 con CDK9. Por otro lado, nuestros datos preliminares indican que ciclin D1 puede inducir estrés en la repliación del ADN (DRS) en células B. Nos proponemos caracterizar el estrés transcripcional (TS) y replicativo mediado por la sobreexpresión de ciclina D1, definir la relevancia de estos procesos en la patogénesis del LCM y explorar posibles implicaciones terapéuticas. Analizaremos si el TS inducido por ciclina D1 es dependiente de CDK4 mediante el estudio de un mutante de ciclina D incapaz de activar la quinasa (D1-K112E) y si otras ciclinas D también inducen TS. Para caracterizar en detalle el TS analizaremos la localización de RNA Pol II activa (GRO-seq) y lo combinaremos con datos sobre RNA Pol II total (ChIP-seq) y niveles estables de RNA (RNA-seq). Por otro lado, determinaremos mediante DNA combing el DRS inducido por ciclina D1 y el DRS presente en líneas celulares de LCM. Investigaremos si este DRS se correlaciona con los niveles de D1, es dependiente de CDK4 o es modulado tras el silenciamiento de CDK9. También estudiaremos si la sobreexpesión de D1 genera R-loops (slot-blot, inmunofluorescencia y DRIP-seq), una estructura del ADN que puede promover conflictos entre la replicación y la transcripción. Posteriormente, investigaremos si tumores primarios de LCM muestran evidencias de experimentar DRS y/o TS, y valoraremos el potencial valor pronóstico de su detección. También generaremos una firma génica de ciclina D1 que muestre valor pronóstico en LCM, tanto en muestras de tejido como de sangre periférica. Por último, exploraremos la existencia de letalidad sintética entre la sobreexpresión de ciclina D1 y la inhibición de procesos celulares desregulados por ciclina D1

Ciclina D1
Linfoma de células del manto
estrés de replicación del ADN
estrés transcripcional