Introduccion Las mutaciones en el gen de la quinasa LRRK2 son la causa más común de la enfermedad de Parkinson familiar (EP) y también son responsables de un porcentaje significativo de casos de EP esporádicos (L2EP). Las dianas moleculares exactas de esta quinasa y las vías de señalización involucrados no se conocen bien y estén siendo investigadas. Sin embargo, la mutación LRRK2 causa EP con penetrancia incompleta. Por lo tanto, los portadores sanos de esta mutación son individuos con cierto riesgo de desarrollar EP (portadores de mutación no enfermos: PNE) sujetos en los que biomarcadores pronósticos podrían ser ensayados. Objetivos 1) Realizar una caracterización dual fosfoproteómica y transcriptómica de L2EP en un modelo de fibroblastos para comprender mejor la cascada de señalización fisiopatológica asociada con LRRK2. Este conocimiento podría servir como marcadores para futuros estudios de inhibición de LRRK2 de respuesta a fármacos en ensayos preclínicos. 2) Realizar una caracterización dual fosfoproteómica y transcriptómica en sujetos con riesgo genético de padecer EP (PNE) y evaluar su valor clínico potencial como biomarcadores pronósticos. Métodos Los fibroblastos de biopsias de piel se cultivarán en condiciones estándar. De cada paciente se obtendrán dos alícuotas, una para el análisis de transcriptoma (RNAseq) y otra para el estudio de fosfoproteoma (espectrometría de masas). Los resultados se confirmarán mediante transferencia Western y PCR cuantitativa. Se realizará un análisis bioinformático combinado para determinar los genes / proteínas y las vías biológicas afectadas en la L2EP y en los PNE. Resultados esperados Este proyecto profundizará en el conocimiento de la vía de señalización de LRRK2, proporcionando lecturas bioquímicas útiles para probar futuros inhibidores de LRRK2 como biomarcadores de respuesta a fármacos en ensayos preclínicos, y también como potenciales biomarcadores pronósticos en PNE.

Transcriptómica
fosfoproteomica
señalización LRRK2
enfermedad de Parkinson