La interacción PSGL-1 (leucocitos)/P-selectina (Psel) (endotelio) está implicada en el desarrollo de la tolerancia inmunológica y control de la autoinmunidad. En nuestro trabajo previo hemos descrito que los ratones PSGL-1 KO desarrollan un síndrome similar a la esclerodermia y que la deficiencia en Psel induce un síndrome autoinmune similar al lupus. En ambos ratones KO, los animales envejecidos desarrollan neumonía intersticial (ILD) y además las hembras desarrollan hipertensión pulmonar (PH), sugiriendo que en pacientes (esclerodermia y lupus) y en ratones KO (PSGL-1 y Psel, respectivamente) ocurren alteraciones similares a nivel celular y molecular. Nuestros resultados preliminares sugieren que PSGL-1 podría regular la expresión y actividad de la chaperonas HSP40 y Hsp70 y la formación de redes extracelulares de DNA (NET) Los objetivos propuestos son: 1)En humanos estudiar: A)Modulación de la expresión y actividad de las chaperonas Hsp40 y Hsp70 tras su interacción con Psel en monocitos. B)La implicación de la interacción PSGL-1/Psel en la formación de NETs en condiciones de salud y enfermedad. C)perfil de Hsp40 y Hsp70 en el suero de pacientes. 2)En ratones (WT y PSGL-1 y Psel KO: A)Análisis de las poblaciones del sistema inmune en el lavado broncoalveolar (BAL). B)Perfil de citocinas y miRNAs en suero y BAL. Estrategia de estudio: 1)Donantes sanos y enfermos: Se aislarán monocitos y neutrófilos circulantes y se analizará mediante inmunofluorescencia (IF) las estructuras celulares enriquecidas en PSGL-1, ADAM8, Hsp40 y Hsp70 y mediante citometría de flujo (FC) e IF, la formación de cuerpos apoptóticos y NET tras tratamiento con el inhibidor de ADAM8 e incubación con Psel; en suero se analizará el perfil Hsp mediante ELISA. 2)En ratones: Se obtendrá suero, BAL y pulmón y caracterizaremos mediante FC las poblaciones presentes en pulmón y BAL, el perfil de citocinas en el BAL mediante flow cytomix y el perfil de miRNAs en BAL y suero mediante arrays y qPCR

PSGL-1
P-selectina
ADAM8
Esclerodermia
Lupus
ILD
PAH