Las enfermedades de depósito lisosomal (LSD) son un grupo de hasta 70 enfermedades raras causadas por disfunciones de proteínas lisosomales concertas. Nuestro grupo ya ha demostrado la viabilidad de producir a-galactosidasa (GLA), enzima defectuosa en la Enfermedad de Fabry (FD), en vesículas extracelulares (EVs). La carga de la enzima GLA en EVs mejora la actividad de la enzima y su biodistribución, permitiendo el acceso al cerebro y proporcionando un sistema terapéutico más eficaz que el tratamiento actual en pacientes con FD. El presente proyecto tiene como objetivo avanzar en el desarrollo de las EVs como tratamientos para 2 LSDs, la FD, con la intención de avanzar en el TRL de tratamientos basados en EVs, y la enfermedad Niemann Pick C1 (NPC1), con el fin de proporcionar una prueba de concepto en el uso de tratamientos con EVs en LSDs causadas por defectos en los transportadores lisosomales. Con estos objetivos específicos, trabajaremos en tres niveles diferentes: 1) Se introducirán modificaciones genéticas específicas en la secuencia de las proteínas lisosomales (GLA y NPC1) que las conducirán hacia las EVs, y además se co-transfectarán con chaperonas como la Hsp70 o péptidos penetrantes fusionados con Lamp2 (F7 y RVG) para aumentar la estabilidad y la penetración celular/tisular de los EVs, respectivamente. 2) Las fábricas productoras de EV (células de HEK) serán modificadas genéticamente para anular la expresión del ITGaVß5 causante del secuestro hepático de las EVs y permitir la expresión de ITGaL que favorecerá la llegada al sistema nervioso central de las EVs. También se incluirán mejoras en los métodos de aislamiento/purificación de las EVs. 3) Las EVs diseñadas se probarán en modelos in vitro e in vivo clínicamente relevantes, incluidos fibroblastos derivados de pacientes con mutaciones conocidas de GLA y NPC1 y el modelo de ratón de FD.

Enfermedades de depósito lisosomal
vesículas extracelulares
terapia enzimática sustitutoria
enfermedad de Fabry
enfermedad de Niemann Pick C1