Nuestro objetivo es la caracterización genómica de una serie de pacientes con LMA de alto riesgo para comprender mejor la patogenia de la transformación mieloide, el proceso por el que las células sensibles al tratamiento se transforman en resistentes. El objetivo es predecir los mecanismos de resistencia antes de la recaída y prevenirla, con una terapia dirigida adecuada. Analizaremos el perfil de mutaciones mediante secuenciación masiva (NGS), utilizando un panel Panmieloide propio, una estrategia genómica integrada de ADN / ARN, que incluye 72 genes para detectar mutaciones, variaciones en el número de copias y reordenamientos en neoplasias mieloides. Nos centraremos en pacientes con LMA refractaria (n = 50), LMA extramedular (n = 20) y LMA secundaria (n = 20), caracterizando los blastos que residen en la médula ósea, sangre periférica o tejidos extramedulares. Todos los pacientes serán tratados de manera uniforme según los protocolos de PETHEMA. Analizaremos la diversidad clonal de muestras pareadas (antes y después del tratamiento) de pacientes con LMA en recaída y/o refractaria, muestras pareadas de médula ósea y tumores extramedulares en pacientes con LMA extramedular, y compararemos el perfil mutacional de la LMA secundaria y con la LMA de novo. Para comprender cómo la diversidad clonal en la LMA puede contribuir al desarrollo de resistencia a la terapia y para inferir las relaciones clonales entre las mutaciones driver, realizaremos secuenciación de ADN dirigida a nivel de célula única, utilizando la plataforma Tapestri en una serie de pacientes seleccionados. Nuestro objetivo es identificar un clon único de células leucémicas no detectable con NGS, responsable de la recaída/resistencia o la infiltración extramedular. Además, realizaremos PCR digital para confirmar las variantes detectadas por single cell pero no por NGS convencional, para identificar pacientes refractarios con mutaciones dirigibles, y para el seguimiento de EMR en pacientes seleccionados.

Leucemia mieloblástica aguda
quimiorresistencia
recaída
NGS
secuenciación de célula única